原代PBMC电转染效率低｜这篇论文的参数可以直接抄

做原代免疫细胞电转，转完细胞状态差、阳性率上不去，是挺常见的问题。

某课题组在绵羊外周血单核细胞（PBMCs）里递送 miRNA mimics，用的是 Engreen 的 Entranster TME 电转液，电转后细胞能正常培养并检测细胞因子。

他们公开的条件：
▫️ 细胞：绵羊 PBMCs，约 1×10⁶ 个/管
▫️ 核酸用量：egr-miR-71 mimics 或阴性对照 100 nM，1.25 μL 加入每 100 μL 电转缓冲液
▫️ 电转杯：4 mm 间隙
▫️ 电转参数：150 V、25 μF、50 Ω、6 ms
▫️ 电转后培养基：RPMI-1640 + 100 ng/mL LPS + 10 ng/mL IFN-γ
▫️ 检测时间点：转染后 12 h 和 24 h 收集上清

论文出处：DOI 10.1051/parasite/2023060

适用边界：这套参数针对绵羊 PBMCs 和 miRNA mimics，换细胞类型或核酸种类时，电转参数需要重新摸索；原代细胞状态差异大，建议先做小体系预实验。

你电转原代免疫细胞时，最常卡在效率还是细胞状态？

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本文同步发表于小红书「英格恩生物」。

原文献页:英格恩官网文献页