海马立体定位注射递送 siRNA：TMEM16F 敲低改善 APP/PS1 小鼠空间记忆的实验解读

1. 研究背景与问题

TMEM16F 参与凝血、细胞膜融合和骨矿化等多种生理过程，其激活也在多种中枢神经系统疾病中被研究。已有研究发现 TMEM16F 高表达与小胶质细胞吞噬和转化有关，而小胶质细胞介导的神经炎症是推动阿尔茨海默病进展的关键因素。然而，针对 TMEM16F 如何影响阿尔茨海默病神经炎症的研究还很少。本研究通过体外和体内建立 TMEM16F 敲低的 AD 模型，探究 TMEM16F 介导神经炎症的调控机制。

2. 模型与分组

研究使用 9 月龄 APP/PS1 小鼠，分为四组：WT 组（n=10）、APP/PS1 组（n=10）、APP/PS1-NC 组（n=10）和 APP/PS1-siRNA TMEM16F 组（n=10）。体外实验用 Aβ25-35 刺激人小胶质细胞构建 AD 细胞模型。

3. 本公司产品在这个实验里具体怎么用的

本实验采用海马立体定位注射将 TMEM16F siRNA 递送至小鼠脑内，使用的转染试剂是 Entranster™-in-vivo（货号 18668-11-1，Engreen Biosystem）。具体操作如下：将 5 μg siRNA-NC 或 siRNA-TMEM16F 溶于 5 μL 无 RNase 水中，与 10 μL 转染试剂混合。小鼠用 2% 苯巴比妥（45 mg/kg）腹腔注射麻醉后，固定于立体定位仪，以 0.2 μL/min 的速率向双侧海马注射 5 μL 混合物。

4. 结果要点

研究显示，9 月龄 APP/PS1 小鼠脑内 TMEM16F 水平升高。敲低 TMEM16F 后，小鼠空间记忆能力改善，小胶质细胞向 M2 表型极化增加，NLRP3 炎症小体激活受到抑制，脑组织细胞凋亡和 Aβ 斑块沉积减少，脑损伤减轻。

5. 这个案例对同类课题的参考价值

对于需要将 siRNA 递送至小鼠脑内特定区域的研究，本案例提供了一种可参考的体内转染方案：通过立体定位注射将 siRNA 与 Entranster™-in-vivo 的混合物直接递送至海马，实现目标基因敲低。实验中明确了 siRNA 用量（5 μg）、转染试剂用量（10 μL）、注射体积（5 μL）和注射速率（0.2 μL/min），这些参数可为类似脑区递送实验提供借鉴。若您需要针对不同细胞类型或应用场景选择转染试剂，可参考转染试剂选型指南。

6. 文献出处

标题：TMEM16F may be a new therapeutic target for Alzheimer’s disease.DOI：10.4103/1673-5374.350211

本文同步发表于微信公众号「英格恩生物」。

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