英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
标题：Rab5-mediated VE-cadherin internalization regulates the barrier function of the lung microvascular endothelium
影响因子：5.808（Cellular and Molecular Life Sciences, 2015年）
文献概要
该研究探讨了Rab5a在脂多糖（LPS）诱导的肺微血管内皮屏障功能障碍中的作用及其机制。研究发现，LPS通过激活和上调Rab5a的表达，促进血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）的内化，导致细胞极性紊乱和内皮屏障功能破坏。通过siRNA敲低Rab5a表达，可显著抑制LPS诱导的VE-cadherin内化、F-肌动蛋白重组和内皮屏障功能损伤。此外，体内实验表明，Rab5a敲低能够减轻LPS诱导的肺微血管通透性增加和肺损伤。这些结果表明，Rab5a是LPS诱导的内皮屏障功能障碍的关键调控因子，可能成为治疗血管炎症和屏障功能紊乱的潜在靶点。
采用英格恩（Engreen）产品的实验部分
在研究中，作者使用了英格恩生物（Engreen Biosystem）的“EntransterTM-in vivo transfection reagent”进行体内siRNA转染实验。具体步骤如下：
- 体内siRNA转染：
- 使用EntransterTM-in vivo转染试剂，通过尾静脉注射将Rab5a siRNA导入C57BL/6小鼠体内。
- 转染后第5天，通过腹腔注射LPS诱导脓毒症模型，观察Rab5a敲低对肺内皮屏障功能的保护作用。
- 实验结果：
- 转染效率高，Cy3标记的siRNA在肺组织中成功表达。
- Rab5a siRNA显著降低了肺组织中Rab5a的表达，并减轻了LPS诱导的肺微血管通透性增加和肺损伤。
实验意义
- 机制揭示：
- 阐明了Rab5a通过调控VE-cadherin内化和细胞极性，参与LPS诱导的内皮屏障功能障碍的分子机制。
- 治疗潜力：
- 证明Rab5a是潜在的干预靶点，为急性肺损伤（ALI）和急性呼吸窘迫综合征（ARDS）等疾病的治疗提供了新思路。
- 技术应用：
- 成功利用英格恩的体内转染技术实现siRNA的高效递送，为后续基因功能研究和药物开发提供了可靠工具。
- 临床转化：
- 研究结果为开发靶向Rab5a的疗法（如siRNA药物）以保护内皮屏障功能奠定了基础，具有重要的临床意义。
总之，该研究不仅深化了对内皮屏障调控机制的理解，还展示了英格恩转染试剂在体内基因沉默研究中的实用价值。