2022年 5月 17日, 星期二
新闻

实验过程中如何进行无菌操作?

倒灌

左手拿接受容器, 右手拿供液容器。
1. 用火烧一下接受容器的开口,并且在火焰旁边保持一定的角度。
2. 用火烧一下供液容器的开口, 并在火焰上烧1 ~ 2秒,不要烧糊液体。
3. 将供液容器放在距接受容器上方2 英寸处, 并使二者成适当的夹角。
4. 倾斜瓶子并倒出溶液。
5. 倒完后用火分别烧一下两个瓶口。

由于倒淮比移液要更容易产生污染, 所以只有在转移大量的溶液时才使用倒灌这种操作。

过滤除菌

用注射式过滤器过滤少量溶液

材料

  • 一次性0.2 μm 的滤器。
  • 相应体积的注射器(1 ml 、2 ml 、5 ml 、10 ml 或20 ml,  50 ml 的注射器徒手操作比较困难),使用灭菌或一次性注射器。
  • 使用无菌的管子作为接受容器。
  • 试管架。
  1. 仅撕开滤器的上包装,即较粗的一端,可以插在注射器的顶端。
  2. 将注射器从包装中拿出,把推杆抽出,放置在清洁的台面。
  3. 将注射器顶端的保护头拿下,立即插在滤器上,注意不要把滤器拿出包装,把装好的装置放在清洁的台面。
  4. 将灭菌的管子打开盖子,放在试管架上。
  5. 将滤器从包装中拿出,放入试管中,拿住注射器,保持竖直状态。
  6. 将液体倒入注射器中,插回推杆,用力但要慢慢地使液体流经滤器后流入试管内。
  7. 将试管盖好,做好标签,将注射器丢弃到装有生物危害的尖利物垃圾箱内。

使用杯状滤器过滤大体积的溶液

材料

  • 一次性0.2 μm 的滤器。
  • 放置滤器的铁架台或架子。
  • 无菌的试剂瓶用来装过滤后的溶液。
  • 真空器,实验台上见到的家用真空泵是最常用的设备,这种设备是用水或泵驱动的。
  1. 将冲器和真空泵用软管相连,滤器用夹子固定在架子上,保持竖直和稳定。
  2. 将溶液倒入滤器,溶液体积大时可以分批次将液体倒入滤器。
  3. 将滤器的盖子盖上,缓慢打开真空泵,溶液会慢慢地从滤器中抽出来。有些滤器可以配上尤菌的试剂瓶,这样过滤后的溶液可直接存放在试剂瓶中。
  4. 关闭真空泵,等待一会。
  5. 从滤器上拔下真空泵的管子,立刻将过滤好的液体倒入一个无菌的试剂瓶保存。如果容器是过滤装置的一部分时,只需先把容器的盖子盖好。
  6. 试剂瓶上做好标签,注明已经过滤除菌(FS) ,弃掉滤器。

抽气操作

使用抽气移出液体的操作和使用移液器的操作十分类似,同样要收拾好工作区间,但要多出一个容器用来临时放置用过的移液管或吸管。

  1. 打开移液管或巴氏管的包装,安装一个到抽气瓶上。
  2. 用左手拿住吸管,插入右手拿的橡皮管中。
  3. 用手握住插入橡皮管的吸管部分。
  4. 如果是玻璃的吸管用火稍微的烧一下。
  5. 打开真空泵。
  6. 打开要吸取液体的试管或容器,同样用右手剩余的两个手指夹住盖子,并把试管或容器保持45℃
  7. 用火焰烧一下试管口。
  8. 把吸管头刚好插入液面以下,并随着液面的下降而下降。
  9. 快到底部时,稍微抬起一点吸管,使吸管头在沉淀上方附近缓慢移动,直至吸完,但不要碰到沉淀。
  10. 将吸管放入事先准备好的容器,以便处理。
  11. 将容器口烧一下,盖好。
  12. 将容器或试管竖直放置,确认液体已经吸完。
  13. 关闭真空泵,取下吸管。

使用抽气操作有传染性的物质时,必须在抽滤瓶和真空装胃之间接上一个盛水的滤器,可以防止那些物质进入真空装置中。当真空度降低时,说明滤器已经被浸湿,必须更换,所以要事先准备好备用的滤器。

 

推荐

启动子甲基化调控的miR-148a-3p通过靶向MAP3K9抑制肺腺癌的进展

非小细胞肺癌(NSCLC)占各 …

发表评论

您的电子邮箱地址不会被公开。