2022年 8月 17日, 星期三
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石蜡包埋法如何选择石蜡?

石蜡包埋法是组织学制片中最常用的方法、石蜡(paraffin)是由石油中分离出来的一种甲烷, 系固体碳化氢, 呈蜡样半透明的结晶块状。切片用石蜡应选优质的品种, 要纯而透明, 并有适当黏性。根据熔点的不同,有软蜡和硬蜡之分,软蜡的熔点为52~56°C ,硬蜡为60~62°C 。在室温高时用硬蜡,室温低时用软蜡;薄切片宜用硬蜡, 厚切片宜用软蜡。新蜡内含气体,应预先在温箱熔化、冷却、再熔化,反复几次,以排出气体、增加密度,过滤后使用。

组织经透蜡后,浸入Ⅰ 蜡(石蜡十二甲苯),再入Ⅱ 蜡,最后入Ⅲ蜡。用包埋蜡或Ⅲ蜡包埋。注意,所有石蜡必须保持清洁,贴有标签,否则会导致失败。石蜡包埋最关键的问题是温度,温度低时,若石蜡稍凝固,就难以浸透,即使延长时间,也不能透入,达不到预期效果;温度过高,则组织变脆,不能切片。理想的温度是所用石蜡的熔点温度,如石蜡是60℃ 熔点,那么包埋箱温度最好也维持在60℃。

包埋箱最好是隔水式电热箱,它的温度来自四面八方,箱内温度均匀。而电热干燥箱是以箱底电炉丝加热,箱内上下层间温度差异很大,难于掌握。包埋时,用纸盒包埋框或金属包埋框包埋,也可用培养皿包埋,视具体情况而定。透入(浸蜡)时间的长短,以组织块的大小、厚薄、性质、密度等因素的变化灵活掌握。一般来说,对细胞密集、纤维成分少的组织器官,如肝、脾、淋巴结、骨髓等,应减少时间;对含脂肪和纤维成分较多的组织器官,需增加时间。已包埋好的蜡块,应贴标签、号码,可以长期保存。

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