2022年 1月 28日, 星期五
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划痕实验检测肿瘤细胞的运动性

划痕实验是一种简单易行的检测肿瘤细胞运动的方法, 实验成本低, 可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。

(一)材料与设备

6 孔板或者培养皿, 10 μl 或者200μl 无菌的枪头, Marker 笔,直尺。

( 二)操作步骤

1. 先用Marker 笔在6 孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,每隔0.5-1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5 条线。
2. 6 孔板中加入约5X 105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3. 第二天用枪头按照6 孔板背后的横线垂直的方向进行划痕,枪头要垂直,不要倾斜。
4 . 用PBS 清洗细胞3 次,去除脱落的细胞, 加入无血清培养液。
5. 放入37°C 5% CO2 培养箱培养。按Oh 、6h 、12h 、24h 取样, 拍照。

( 三)小结

1. 一般做划痕实验,都是在无血清或者低血清(小于2% )状态下培养的,否则细胞增殖就不能忽略。
2. 按照6 孔板背后画线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点, 作为固定的检测点,这就解决了前后观察时位置不固定的问题。

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