2021年 12月 8日, 星期三

细菌生长曲线的测定及其意义

细菌生长曲线,就是将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中,在适宜的条件下进行培养,定时测定培养液中的菌量,以菌量的对数作纵坐标,生长时间作横坐标,绘制曲线。

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一、 细菌生长曲线的测定方法

1、菌种培养:取大肠杆菌斜面菌种1支,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏 蛋白胨培养液(LB)中,静止培养12–14h,备用。

2、制备LB培养基100ml置于200ml三角瓶内,备用。

3、标记:取11支无菌大试管,用记号笔分别标明培养时间,即0、1.5、3、4、 6、8、10、12、14、16和20h。

4、接种:分别用5ml无菌吸管吸取5ml大肠杆菌培养液(培养12~14h)转入盛有100ml LB液的三角瓶内,混合均匀后分别取5ml混合液放入上述标记的11支无菌大试管中。

5、孵育:在37℃,180rpm摇床上震荡

6、检测:依次按时间取出0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h的试管,在600纳米波长处测定菌液浓度(OD值)

7、绘制曲线:将所测得的一组OD值与其相应的培养时间作图,即可绘制出该菌的生长曲线。

二、细菌生长曲线的测定意义

细菌生长曲线反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。大多数细菌的繁殖速率很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次。依据其生长速率的不同,一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。因此通过测定微生物的生长曲线,可了解各菌的生长规律,对于科研和生产都具有重要的指导意义。

微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标,OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度。通常400~700nm 都是微生物测定的范围,505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。

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