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动物体内转染常见问题与解决方案

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EntransterTM-in vivo体内转染试剂通过纳米技术合成,通过物理作用与核酸结合,浓缩包裹核酸,从而保护核酸免受免疫系统破坏,同时增强核酸进入细胞核中表达。不含任何动物来源成分,由于处于纳米尺度,粒径小,不易引起免疫反应,不影响动物和器官组织的功能,可以多次在同一动物注射。

一般情况下,核酸(μg)和EntransterTM-in vivo (μl)按照1:2的比例使用。通过尾静脉注射或局部注射,在动物体内发挥全身或局部的作用。一般来说,根据注射方法和靶器官的差异,12-48小时后基因表达效果较好。一次给药检测的最佳时间是注射后12-48小时。如果需要维持长期效果,可以采用多次注射的方法,注射频度一般为每间隔2-3天一次,也可以根据实验情况适当延长至每7天一次。

 

常见问题与解决方案

  1. 转染复合物出现沉淀
  • 核酸用TE等溶解:核酸用适量无内毒素纯水稀释成1μg/μl(如核酸原液浓度小,注射体积会增大)
  • 注射时的核酸终浓度过高:注射时的核酸终浓度<=0.5μg/μl
  • 转染复合物被冻存或低温放置时间过长:转染复合物最好即配即用
  1. 转染水平低

给药剂量低:在不造成动物死亡前提下,提高给药剂量

  1. 动物有炎性反应或死亡
  • 注射操作有误 :将药液正确注射到相应部位
  • 核酸用量过大:降低核酸用量,保持核酸和转染试剂比例,同步降低转染试剂用量。
  • 注射液中含内毒素:采用无内毒素的核酸,注射前,采用22μm滤器过滤除菌

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