英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。其5年生存率低于30%。食管癌分为鳞状细胞癌和腺癌两大类。食管癌多为鳞状细胞癌，占食管癌的90%。近年来，尽管食管癌的治疗进展越来越快，但食管鳞癌患者的总体预后仍然很差，情况仍不容乐观。早期发现和干预对提高食管癌预后具有重要意义。现分享一篇pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与人IL-37b 基因真核表达载体的构建与表达研究
ＩＬ-３７基因位于人类第二号染色体上，共有五种不同的剪切亚型，即ＩＬ-３７ａ ～ｅ，其中ＩＬ-３７ｂ 是五种亚型中分子量最大的一个 。ＩＬ-３７ 具有广泛的炎症抑制作用，可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ，另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
阅读更多 »如何通过电穿孔转染DNA？
试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水） 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶（75cm2） 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天，通过胰酶消化释放贴 …
阅读更多 »如何得到更高的DNA细胞转染效率？
我认为，要想更高的细胞DNA转染效率，应注意以下几点： 1， 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率 …
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒 …
阅读更多 »进行2个不同基因的siRNA共转染，需要加大核酸或者转染试剂的剂量吗？这个和做2个质粒共转染有什么区别？
进行2个不同基因的siRNA共转染时，确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量，但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量： 当你进行siRNA共转染时，转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说，一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多，因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内，只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与STAT3调控的分子机制研究
信号传导子及转录激活子3（STAT3）是一个介导的各种细胞和生物过程的关键的转录因子，如细胞生长、细胞凋亡、免疫反应和肿瘤。然而，STAT3调控的分子机制仍知之甚少。现分享一篇运用DNA转染（Entranster）与STAT3调控的分子机制研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞（IPS）。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统，使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程；不同发育阶段的细胞可确定胚胎发 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究
动脉粥样硬化（AS）是各种心脑血管疾病的主要病因，发病率和死亡率都很高。氧化应激诱导内皮细胞功能障碍是动脉粥样硬化的病理基础。此外，鞘磷脂和Wnt/β-连环素信号通路被认为与AS密切相关，但具体机制尚不清楚。 现分享一篇DNA转染（Entranster）与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质 …
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