2026年 3 月 15日, 星期日
新闻

病毒感染

过表达间充质干细胞的膜蛋白,但是慢病毒感染后,长很慢,并且传代后死很多,怎么办呢?(加完慢病毒24h后我是用20%血清去养的)

间充质干细胞(MSCs)本身就对外界刺激比较敏感,而表达的又是膜蛋白,这通常比表达胞质蛋白(如 GFP)更具细胞毒性。这种情况确实挺让人头大的。 膜蛋白在合成后需要经过内质网和高尔基体的复杂加工、折叠并转运至细胞膜。过表达膜蛋白往往会给细胞的分泌通路造成巨大的生化负担(ER Stress),甚至改变膜的通透性或信号转导,导致细胞生长停滞或凋亡。 针对你的情况 …

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慢病毒感染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …

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逆转录病毒可以共感染吗?

可以。逆转录病毒(如MLV、lentivirus等)可以共感染同一细胞,尤其是不同病毒包装不同的转基因载体时,可以实现共转导(co-transduction),从而使同一细胞获得多个基因。 但要注意: 病毒滴度足够高:每个病毒的MOI(Multiplicity of Infection)需要合适,才有可能让同一细胞被两种病毒都感染。 标记或选择机制清晰:常用 …

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请问那乳胶法能测出失活病毒么

乳胶法(Latex agglutination test)是一种常用于检测抗原或抗体的免疫学方法,通过抗原抗体反应引发乳胶微粒的凝集。乳胶试剂通常含有涂有已知抗原或抗体的乳胶微粒,这些微粒能够与相应的抗原或抗体结合,形成可见的凝集反应。 乳胶法检测失活病毒的可行性 乳胶法 本质上是基于抗原-抗体反应来进行检测的。如果病毒被“失活”(即病毒的活性丧失),但其结 …

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慢病毒感染中细胞密度需要考虑的因素

细胞类型: 不同细胞系对慢病毒的感染效率不同。例如,一些细胞对病毒更敏感,需要更低的病毒量和细胞密度。 敏感细胞系(如HEK293T):种植密度可稍低; 难感染细胞系(如原代细胞):需要更高密度。 病毒滴度: 如果病毒滴度高,细胞密度可以稍低。 如果病毒滴度较低,建议适当提高种植密度,并配合 增强试剂(如Envirus-LV) 提高感染效率。 LV感染目标: …

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AAV病毒感染,tu/ml和vg/ml 的单位如何 换算

在AAV病毒感染实验中,TU/mL(转导单位每毫升,Transduction Unit per milliliter)和vg/mL(病毒基因组拷贝数每毫升,Viral Genome copy per milliliter)是两种常见的病毒滴度单位。它们表示的是病毒浓度的不同方面: TU/mL:代表的是真正具有转导能力的AAV颗粒的数量,也就是能够在宿主细胞中 …

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慢病毒倍比稀释测定活性的实验中,DAY2天时,把稀释好的病毒和细胞孵育过夜时,用把细胞原培养基吸取出去吗,还是直接把病毒液添加进去?

好问题!在进行 慢病毒倍比稀释测定病毒滴度(titer) 的时候,DAY2 加入病毒时是否更换培养基,确实是一个关键点,对感染效率有一定影响。下面是两种常见操作方式,以及推荐做法: 推荐操作:先吸掉培养基,再加病毒(常规做法) 流程简述(以DAY2为节点): DAY1:铺板细胞(如293T、HEK293,常用于测滴度); DAY2:感染操作 吸掉旧培养基; …

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是否有嘌呤霉素筛选标记的病毒的病毒滴定protocol,看了好多好多不一样的?这个有比较权威又大众的滴度操作流程吗?

关于使用嘌呤霉素筛选标记(puromycin resistance marker)的慢病毒(lentivirus)或逆转录病毒(retrovirus)进行病毒滴定(virus titration)的 protocol,确实有不少不同的做法,这是因为不同实验室根据自己的系统和需求进行了优化。但是,有一些权威且广泛应用的标准流程可以作为通用参考,下面是整理的一个 …

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慢病毒感染后,细胞不生长原因?

慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。 以下是一些常见的原因和解决方法: 1) 病毒滴度过高: 原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。 解决方法:降低病毒的滴度,进行一系列稀释实验,找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 2) 细胞状态不佳: 原因:感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法:确保细胞在最佳状态下进行感染 …

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