英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
细胞DNA转染效率的影响因素 1.细胞密度 一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的 …
阅读更多 »瞬时转染后，划痕实验的最佳时间
瞬时转染后，划痕实验的最佳时间取决于几个因素，包括转染效率、基因表达时机以及细胞状态。一般来说，常见的策略如下： 1. 24 小时后划痕（常规选择） 绝大多数瞬时转染的基因在 24 小时左右开始有较高的表达水平，因此转染 24 小时后划痕是一个常见的选择。 这个时间点可以确保大部分细胞已成功表达外源基因，同时细胞仍然具有良好的活力，不会因过度表达导致过早凋亡 …
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞（IPS）。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统，使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程；不同发育阶段的细胞可确定胚胎发 …
阅读更多 »荧光表达的细胞在冻存后72小时后再测荧光情况，可以吗?
荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光，但有几点需要注意： 细胞存活率：冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好，具有正常的形态和活力。 荧光稳定性：荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。确保荧光信号在解冻后仍然足够强且稳定。 冻存条件：使用适当的冻存保护剂（如DMSO）并在-80°C或液氮中冻存，以尽量减 …
阅读更多 »DNA转染与菱形蛋白酶RHBDD1诱导蛋白水解靶点研究
在过去的几十年中，研究发现，调节性膜内蛋白水解（RIP）在各种细胞过程中起着重要的作用，包括细胞信号转导、基因转录和凋亡。调节性膜内蛋白水解是蛋白酶在其跨膜区域内切割底物的过程。已鉴定出三种主要的膜内蛋白酶家族，包括金属蛋白酶型S2P家族、C-分泌酶和信号肽肽酶家族和菱形蛋白酶。现分享一篇DNA转染（En …
阅读更多 »pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究
食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。其5年生存率低于30%。食管癌分为鳞状细胞癌和腺癌两大类。食管癌多为鳞状细胞癌，占食管癌的90%。近年来，尽管食管癌的治疗进展越来越快，但食管鳞癌患者的总体预后仍然很差，情况仍不容乐观。早期发现和干预对提高食管癌预后具有重要意义。现分享一篇pcDNA转染（Entranster）与胞外小泡和食管癌进展研究的文献，以供参考。
阅读更多 »请问一下，转染带荧光标记的NC，转染后需要拍照看转染效率，在转染后4-6小时换液吗？
一般原则： 1.转染试剂对细胞有毒性。因此通常会建议在 4–6小时后更换新鲜培养基，以减轻毒性，保证细胞状态。 2.换液是否影响转染效率？ 针对你要拍荧光观察转染效率的情况： 如果只是想观察转染效率，一般建议 不要太早换液，至少等到荧光信号开始显现（通常24–48小时）再拍照。 如果细胞状态不好（明显发黄、漂浮、死亡增加），建议在 4–6小时换液，以保证细胞 …
阅读更多 »DNA转染（entranster）与MDA-MB-231细胞上皮间质转化研究
乳腺癌是女性最常见的癌症，也是导致癌症相关死亡的主要原因。上皮-间充质转化（EMT）在肿瘤细胞的转移过程和侵袭能力中起着重要作用。现分享一篇DNA转染（entranster）与鞘磷脂合成酶1调节MDA-MB-231细胞上皮间质转化研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA与DNA转染有什么不同？
首先siRNA由于只有二十几个碱基对，相比DNA几千上万对碱基，小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA，而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。其次，siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果，这对于过量表达的DNA转染来 …
阅读更多 »DNA转染与RAB31沉默对骨肉瘤细胞增殖和迁徙影响研究
骨肉瘤（Osteosarcoma，OS）是人类原发性恶性骨肿瘤中最常见的一种类型，具有远距离侵袭和局部侵袭的潜在倾向。OS主要见于青少年儿童，首次发病多为15-19岁。骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤，起源于间充质（因而是肉瘤）的原始转化细胞，表现为成骨细胞分化和产生恶性骨样。现分享一篇DNA转染（entranster）与RAB31沉默对骨肉瘤细胞 …
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