一般原则:
1.转染试剂对细胞有毒性。因此通常会建议在 4–6小时后更换新鲜培养基,以减轻毒性,保证细胞状态。
2.换液是否影响转染效率?
针对你要拍荧光观察转染效率的情况:
如果只是想观察转染效率,一般建议 不要太早换液,至少等到荧光信号开始显现(通常24–48小时)再拍照。
如果细胞状态不好(明显发黄、漂浮、死亡增加),建议在 4–6小时换液,以保证细胞健康。
如果你使用的是 带有荧光标签的siRNA/miRNA NC,通常转染后几个小时荧光就能看到,此时换液与否主要取决于细胞状态。
实用建议:
如果你第一次做该细胞系的转染,可以 分两组做对比:
一组 4–6小时后换液。
一组 不换液。
第二天对比细胞状态与荧光强度,再决定以后是否需要换液。
对大多数细胞系和常用转染试剂来说,4–6小时后换液对转染效率影响不大(DNA/RNA 已经进入细胞)。
有些细胞系对转染毒性耐受度较高,可以不换液,直到24小时后再做处理。
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