丁醇抽提法浓缩核酸

用仲丁醇（ 2 －丁醇）或正丁醇（ 1 － 丁醇）等溶剂萃取水溶液时，部分水分子会进入有机相，而核酸依然留在水相。重复抽提几次后可显著减少核酸溶液的体积。这一浓缩方法可用于减少稀溶液的体积，以使核酸易于通过乙醇沉淀得到回收。

试剂

DNA 样品     异丁醇

方法

1. 计算核酸溶液体积，在2 5 °C 下加入等量的异丙醇。轻微、充分混匀两相。

• 加入过多的异丙醇可能会导致除去所有水分并使核酸发生沉淀。如果发生这种情况，向有机相中加入水直到水相（其中包含核酸分子）再次形成。

2. 室温下，将溶液置于微量离心机中以最大转速离心20s, 或者用台式离心机在1600r/min 下离心。用微量移液器移去上清（异丙醇）
3. 重复步骤1 和2 直到获得想要的水相。

• 因为异丙醇抽提液不能除去盐分， 盐的浓度会伴随体积的减少而增加。核酸可以通过柱层析或者乙醇沉淀转移到适当的缓冲液中。异丙醇在水中最大的溶解度为20℃溶解5% 、30 ℃溶解7.5% 。水在异丙醇中最大的溶解度为20℃溶解5 % 、30℃溶解17.3 % 。