英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
标题：Autophagy-dependent generation of Axin2+ cancer stem-like cells promotes hepatocarcinogenesis in liver cirrhosis 影响因子：（Oncogene，2017年）：7.385（2023年最新IF为8.0，JCR Q1区） 文献概要：自噬是肝硬化的一 …
阅读更多 »USP3 在多器官炎症模型中的调控研究
文献标题：USP3 deubiquitinates and stabilizes the adapter protein ASC to regulate inflammasome activation 期刊信息：Cellular & Molecular Immunology (2022) 影响因子：22.096 (JCR Q1区，免疫学领域顶级期刊) …
阅读更多 »做慢病毒滴度测定实验，请问是所有的都用293t细胞来做，还是说我要在别的细胞上做稳转株，我用别的细胞去摸病毒滴度就可以呀？
核心原则 标准物理滴度测定：强烈推荐使用293T细胞。 功能性滴度测定/特定应用验证：使用你的目标细胞。 详细解释 为什么推荐293T细胞测定物理滴度？ 高易感性： 293T细胞对慢病毒感染非常敏感，因为它们高表达慢病毒进入所需的受体（如LDL受体）。 高转导效率： 它们通常能达到非常高的转导效率（>80%甚至90%+），这使得检测阳性细胞、计算滴度变 …
阅读更多 »MYOD诱导MEG3促进猪卫星细胞分化
标题：MYOD induced lnc-MEG3 promotes porcine satellite cell differentiation via interacting with DLST 期刊： Epigenetics 文章概要 本研究揭示了长链非编码RNA MEG3 在猪卫星细胞（PSCs）分化中的新机制：转录因子 MYOD 直接结合 MEG3 …
阅读更多 »外泌体介导的NF-κB c-Rel靶向治疗在加速角膜伤口愈合中的作用
文献标题 Accelerating corneal wound healing using exosome-mediated targeting of NF-kB c-Rel 采用英格恩产品的实验部分 文献背景 角膜损伤的临床问题： 角膜上皮完整性对视力至关重要，损伤后易引发炎症、感染甚至失明。 糖尿病患者的挑战：近50%患者角膜愈合延迟，易感染。 现有疗法 …
阅读更多 »问：现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里，质粒有10000bp，是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒，过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落，延长培养时间后有个别单菌落，但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢？
以下是详细的优化建议： 优化质粒用量（首要调整）： 问题： 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度（ng/µL），而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小，如果质粒浓度较高，实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理： 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应，严重降低转化效率，尤其对大质粒（&g …
阅读更多 »使用单细胞和空间转录组技术揭示脑出血铁死亡机制
文献标题 Single-cell and Spatial Transcriptomics Reveals Ferroptosis as The Most Enriched Programmed Cell Death Process in Hemorrhage Stroke-induced Oligodendrocyte-mediated White Matt …
阅读更多 »转染实验加药问题，做荧光定量是不是铺板的时候加药24小时后转染，做wb就是转染12小时后加药呢？
答：你描述的策略（铺板加药做qPCR，转染后加药做WB）是合理的，并且遵循了两种检测方法对时间需求的不同逻辑：qPCR关注转录早期/中期，WB关注蛋白积累的中/后期。 这不是唯一方案： qPCR： 有时也可以在转染后某个时间点（如6-12小时）加药，再培养足够时间（如再培养18-36小时）后收样，总处理时间也可能达到24-48小时。这取决于药物起效速度和你想 …
阅读更多 »巨噬细胞促进肺癌转化机制研究
文献概要 标题：Macrophages promote benzopyrene-induced tumor transformation of human bronchial epithelial cells by activation of NF-κB and STAT3 signaling in a bionic airway chip culture …
阅读更多 »客户问：你好，如果电转以后抗性板子上一个没长，无抗的都长满了，这种情况是没电进去，需要增加次数吗，还是其他原因呢？
回答：“无抗的都长满”，说明细胞活性和数量没问题，基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点：质粒浓度是否足够（建议>100ng/μL）、抗性基因是否匹配（如氨苄不能用于表达AmpR的质粒）、抗性板浓度是否正确（过高会杀死阳性克隆）。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒，但残留的盐 …
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