英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
- 文章标题
《SEMA6B诱导乙型肝炎病毒相关性急性慢性肝衰竭患者巨噬细胞介导的炎症和肝细胞凋亡》
（英文标题：*SEMA6B induces macrophage-mediated inflammation and hepatocyte apoptosis in hepatitis B virus-related acute-on-chronic liver failure*）
- 期刊与影响因子
- 期刊名称：Theranostics
- 影响因子：12.4（2023年数据）
- 出版信息：2024年8月19日在线发表，DOI: 10.7150/thno.97007
- 文献概要
研究背景
乙型肝炎病毒相关的急性慢性肝衰竭（HBV-ACLF）是一种短期死亡率极高的临床综合征，系统性炎症反应和免疫代谢紊乱是其重要发病机制。SEMA6B（Semaphorin-6B）在前期研究中被鉴定为与HBV-ACLF进展相关的关键分子，但其具体作用机制尚不明确。
研究结论
SEMA6B通过诱导巨噬细胞介导的系统性炎症反应和肝细胞凋亡，加剧HBV-ACLF的进展，可作为该病的诊断生物标志物和早期治疗靶点。
- 采用英格恩产品实验部分
使用产品
Entranster™-in vivo（英格恩生物系统，北京，中国）
实验应用（动物体内siRNA递送）
在肝衰竭小鼠模型中，使用Entranster™-in vivo体内转染试剂进行SEMA6B siRNA的尾静脉注射：
原文描述：
“siRNA (μg) and in vivo RNA transfection reagent (μL) (Entranster-in vivo; Engreen Biosystem) (2:1) were mixed in a 5% sucrose solution according to the manufacturer’s instructions.”
对应中文：
siRNA（微克）和体内RNA转染试剂（微升）（Entranster-in vivo；英格恩生物系统）按2:1的比例混合于5%蔗糖溶液中，按照制造商的说明进行操作。
实验方案
| 项目 | 内容 |
| 动物模型 | C57BL/6小鼠，LPS/D-gal诱导的肝衰竭模型 |
| 给药方式 | 腹腔注射（在LPS/D-gal感染前42小时） |
| siRNA剂量 | 5 mg/kg（5′-Cholesterol-SEMA6B siRNA或阴性对照） |
| 转染试剂 | Entranster™-in vivo（英格恩） |
| 混合比例 | siRNA : 转染试剂 = 2 : 1（质量/体积比） |
| 溶剂 | 5%蔗糖溶液 |
实验结果
- SEMA6B siRNA处理组小鼠肝组织中SEMA6B表达显著降低
- 肝功能（ALT、AST）显著改善
- 炎症因子（TNF-α、IL-6）水平降低
- 肝细胞凋亡减少
- 实验意义
科学意义
- 新生物标志物：首次系统验证SEMA6B作为HBV-ACLF诊断和预后生物标志物的价值，在大样本多中心队列和外部验证队列中得到确认。
- 新机制解析：首次阐明SEMA6B通过双重机制——巨噬细胞介导的炎症反应和肝细胞凋亡——驱动HBV-ACLF进展。
- 细胞类型定位：通过免疫荧光染色精确定位SEMA6B在HBV-ACLF患者肝组织中的表达细胞类型（巨噬细胞和肝细胞），为机制研究提供方向。
临床应用价值
- 早期诊断：SEMA6B可作为简便、可及的血液生物标志物，用于HBV-ACLF的早期诊断和风险分层。
- 预后评估：SEMA6B高表达与ACLF分级、INR、ALT等临床指标正相关，且与28天死亡率相关，可用于预后判断。
- 治疗靶点：SEMA6B siRNA治疗在动物模型中显示出显著的治疗效果，提示靶向SEMA6B可能是HBV-ACLF的潜在治疗策略。