Circ_0002456抑制信号通路，减轻人牙髓干细胞中的DNA损伤和炎症反应

1 文献标题

circ_0002456/FUS interaction inhibits NF-κB signaling to attenuate DNA damage and inflammatory responses in hDPSCs
（circ_0002456与FUS相互作用抑制NF-κB信号通路，减轻人牙髓干细胞中的DNA损伤和炎症反应）

2 影响因子

Stem Cell Research & Therapy 期刊，当前影响因子为 7.1（2023年数据，该刊为干细胞与再生医学领域权威期刊）。

3 概要

本研究首次揭示circ_0002456在牙髓炎中的保护作用及其分子机制：

• 临床发现：牙髓炎组织中DNA损伤标志物（γ-H2AX）与炎症因子（IL-6、IL-8、TNF-α）呈正相关。

关键分子：circ_0002456在炎症刺激下表达下调，其环形结构经RNase R抗性实验和Sanger测序验证。

机制阐明：circ_0002456直接结合FUS蛋白，阻止FUS从细胞核向细胞质转移，从而抑制NF-κB通路（p65磷酸化减少），最终减轻LPS诱导的DNA双链断裂和炎症反应 。

体内验证：在小鼠牙髓炎模型中过表达circ_0002456，可显著降低γ-H2AX及IL-6、IL-1β水平。

4 采用英格恩产品实验部分

论文中使用的Entranster™-in vivo DNA transfection reagent（英格恩生物产品）具体应用于以下实验：

实验环节	具体操作细节
体内转染复合物制备	将0.5 µL Entranster试剂与含circ_0002456过表达质粒（2 µg/µL）或空载体的混合液注入小鼠牙髓腔。

转染体积与剂量	每只小鼠注射总容积15 µL的混合物（含5 µg质粒 + 10 µL Entranster试剂），参照产品说明书操作。

验证方式	注射48小时后，通过qRT-PCR验证circ_0002456过表达效率，Western blot检测γ-H2AX蛋白表达变化。试剂在小鼠牙髓炎模型中实现了局部、低毒性的体内质粒递送，确保牙髓组织中circ_0002456的稳定过表达。

该试剂在小鼠牙髓炎模型中实现了局部、低毒性的体内质粒递送，确保牙髓组织中circ_0002456的稳定过表达。

5 实验意义

意义层面	具体阐述
理论创新	首次将circRNA、DNA损伤和牙髓炎联系起来，提出“circRNA-FUS-NF-κB”全新调控轴，拓展了牙髓炎发病机制的表观遗传学认知。
临床转化潜力	circ_0002456作为内源性保护分子，其过表达能同时抑制DNA损伤和炎症，具备双重治疗优势。相较于传统抗炎药物，靶向上游circRNA可能更高效。
方法论参考	研究提供了体内circRNA过表达的标准操作流程（包括Entranster试剂使用参数、牙髓局部注射技巧），为口腔领域其他circRNA的功能研究提供了可复制的动物模型方案。

该研究不仅揭示了牙髓炎治疗的新靶点，也为基于circRNA的牙髓再生策略提供了理论依据。