英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
英文标题：*CircRNA AIDA Regulates Bovine Myoblast Development by Binding miR-29a*
期刊/年份：Cells (2026)，出版信息：2026年2月24日在线发表，DOI: 10.3390/cells15050391
研究对象：牛成肌细胞 (Bovine Myoblasts)
- 研究概要 (Abstract & Summary)
本研究鉴定出一种新的环状RNA——circAIDA（来源于AIDA基因的第2-6号外显子），揭示了其在牛骨骼肌发育中的关键调控机制。
核心机制：circAIDA 主要位于细胞质中，作为 miR-29a 的分子海绵（Sponge）。通过吸附 miR-29a，circAIDA 解除了 miR-29a 对其下游靶基因 AKT3 和 CLCN2 的抑制作用。
细胞水平功能 (In Vitro)：
促进增殖：circAIDA 促进牛成肌细胞的增殖。
抑制凋亡与分化：circAIDA 抑制成肌细胞的凋亡和分化过程。
动物水平功能 (In Vivo)：
在小鼠肌肉损伤模型中，circAIDA 的过表达会削弱骨骼肌的再生能力。这可能是因为 circAIDA 将成肌细胞“锁定”在增殖阶段，阻碍了其向分化的后期进程。
- 采用英格恩 (Engreen) 产品实验部分
根据文档 2.9 Animal Studies (动物研究) 部分的描述，研究人员使用了 Engreen 的体内转染试剂来构建肌肉再生模型。
产品名称：Entranster™-in vivo
应用场景：体内转染 (In vivo Transfection)
具体操作步骤：
复合物制备：将 6.25 µg 的 pcDNA2.1-circAIDA 质粒（过表达质粒）与 Entranster™-in vivo 试剂在室温下预孵育 15 分钟。
注射体系：将上述复合物与 10% 葡萄糖溶液混合至终体积 50 µL。
注射对象：注射入 6 周龄 C57BL/6 小鼠的胫骨前肌（TA 肌肉）。
注射时机：在使用 cardiotoxin (CTX) 造成肌肉损伤后的 12小时、2天和4天 进行注射。
目的：在活体动物模型中实现 circAIDA 的过表达，以观察其对肌肉损伤修复（再生）的影响。
- 实验意义 (Significance)
科学意义
- 机制创新：首次发现circAIDA/miR-29a/AKT3和circAIDA/miR-29a/CLCN2双轴调控网络，拓展了ceRNA机制在肌肉发育中的认知。
- 物种特异性：以牛为研究对象，填补了大型家畜肌肉发育中circRNA功能研究的空白。
应用价值
- 畜牧育种：circAIDA可作为分子标记辅助育种的候选靶点，用于优化肉牛肌肉生长性状。
- 医学前景：circRNA的高稳定性使其成为肌肉相关疾病（如肌营养不良、肌肉萎缩）的潜在诊断标志物或治疗靶点。circAIDA抑制肌肉再生的特性提示，通过抑制其表达可能促进肌肉损伤修复。
实验设计亮点
- 采用RNase R处理和放线菌素D实验严谨验证circRNA的环状结构。
- 通过小鼠肌肉再生模型（CTX诱导）验证circAIDA的体内功能，克服大型动物实验的技术限制。
- 多维度验证（qPCR、Western blot、免疫荧光、双荧光素酶报告）确保结果的可靠性。