英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
文献标题
NEAT1 Promotes Epileptogenesis in Tuberous Sclerosis Complex
影响因子
期刊为 Advanced Science，影响因子为 14.1（文件名中已标注 IF14.1）
全文概要
本研究探讨了长链非编码 RNA NEAT1 在结节性硬化综合征相关癫痫中的作用机制。通过分析临床样本（癫痫性与非癫痫性皮质结节）和构建TSC2条件性敲除小鼠及细胞模型，研究发现：
- NEAT1 在癫痫性结节中显著高表达；
- NEAT1 通过调控 PI3K/AKT/mTOR 信号通路、神经递质受体平衡（NMDA/GABA-A） 和钾离子外流，促进神经元过度兴奋；
- NEAT1 敲低可减少癫痫发作频率、改善空间学习与工作记忆；
- NEAT1 与 PI3K、AKT、mTOR 存在直接分子相互作用；
- NEAT1 还影响细胞增殖与存活，且其作用部分独立于 mTOR 抑制剂（如雷帕霉素）。
采用英格恩产品的实验部分
在动物模型构建中，研究者使用了 Entranster™-in vivo 转染试剂（由 Engreen Biosystem Co., Ltd. 生产），用于将 NEAT1 过表达或敲低慢病毒通过立体定位注射至小鼠侧脑室，以实现 NEAT1 的体内调控。
原文引用（Page 5）：
“NEAT1 lentivirus (5 μL) and Entranster-in vivo transfection reagent (2.5 μL) (Engreen Biosystem, Co., Ltd.) were slowly injected according to the manufacturer’s instructions.”
实验亮点
- 多维度机制解析：从表观遗传、信号通路、神经电生理、行为学等多角度揭示 NEAT1 在 TSC 癫痫发生中的作用。
- 临床与基础结合：使用临床手术样本与基因编辑动物/细胞模型相结合，增强研究临床相关性。
- 双模型验证：同时使用 NEAT1 过表达与敲低模型，双向验证其功能。
- 新型治疗靶点：提出 NEAT1 作为 TSC 癫痫的潜在治疗靶点，并探讨其与 mTOR 抑制剂的联合治疗潜力。
- RNA-蛋白互作验证：通过 RIP-qPCR 证实 NEAT1 与 PI3K/AKT/mTOR 通路蛋白直接结合。
- 电生理功能验证：通过膜片钳技术揭示 NEAT1 对钾离子通道功能的调控。