QBEmax：一种序列置换且内部保护的碱基编辑器（IF:33.1）

文献标题：QBEmax is a sequence-permuted and internally protected base editor

期刊：Nature Biotechnology

影响因子：33.1（2024年）

文献概要：

胞嘧啶碱基编辑器（CBE）显示出多重基因敲除应用的前景，但不纯的编辑、插入和脱靶仍然经常发生。我们在这里描述了QBEmax，它表现出高效率、低indel和脱靶以及高产品纯度，其中高达99.8%的编辑由C-to-T组成。通过分子动力学建模，QBEmax作为一种紧凑稳定的碱基编辑器，保护受保护的碱基免受不希望的修复过程的影响。

使用英格恩（Engreen）产品的实验部分：

在Jurkat细胞中，使用Entranser-E（英格恩生物） 和 Lonza 4D-Nucleofector 系统（程序DS167）共转染了QBEmax或BE4max编辑器质粒及5个sgRNA质粒。

实验意义：

本研究开发了QBEmax——一种通过结构域重排和内部嵌入脱氨酶的新型碱基编辑器（CBE）。其重要意义包括：

1. 高纯度编辑：C-to-T编辑纯度高达99.8%，显著减少C-to-G/A等非目标编辑；
2. 低indel率：平均indel频率降低约56.5%；
3. 宽编辑窗口：可编辑PAM远端至C16位点，扩展了可编辑范围；
4. 低脱靶效应：在DNA和RNA水平均表现出更低的脱靶活性；
5. 适用于多重基因敲除：尤其在CAR-T细胞治疗中，可同时高效敲除多个免疫相关基因（如PD-1、CISH、TRAC等），提升治疗效果和安全性。

总结：该研究不仅提出了一种新型高性能碱基编辑器QBEmax，还通过英格恩的Entranser-E转染试剂在Jurkat细胞中验证了其高效性和安全性，为多重基因编辑治疗（如CAR-T疗法）提供了强有力的工具，具有重要的临床转化潜力。