MYOD诱导MEG3促进猪卫星细胞分化

标题：MYOD induced lnc-MEG3 promotes porcine satellite cell differentiation via interacting with DLST

期刊： Epigenetics

文章概要

本研究揭示了长链非编码RNA MEG3 在猪卫星细胞（PSCs）分化中的新机制：转录因子 MYOD 直接结合 MEG3 启动子诱导其表达；MEG3 作为分子支架与线粒体代谢酶 DLST 相互作用，促进 DLST 蛋白表达（不依赖 mRNA 水平），从而驱动肌肉分化关键基因（MYOD、MYOG、MYHC）表达。体内实验表明，敲低 MEG3 延缓小鼠肌肉损伤修复，证实其在肌肉再生中的关键作用。

采用英格恩（Entranster™）产品的实验部分

实验流程：

1. 肌肉损伤模型： 向小鼠胫骨前肌注射 50μL 心肌毒素（CTX）。
2. 体内转染： 使用 Entranster™ in vivo transfection reagent（英格恩生物公司）分别注射：
   • 实验组：靶向 MEG3 的反义寡核苷酸（ASO-MEG3, 15 μg）
   • 对照组：阴性对照反义寡核苷酸（ASO-NC, 15 μg）
3. 注射时间点： CTX 注射后第 1/2 天、第 2 天、第 4 天（共 3 次）。
4. 样本收集： 第 6 天取肌肉组织，检测 MEG3、MYOD、MYOG、MYHC 表达（qRT-PCR/WB）

实验意义

1. 理论价值：
   • 揭示 MYOD→MEG3→DLST 调控轴是肌肉分化的新通路，首次阐明 MEG3 通过 直接结合代谢酶 DLST 调控蛋白稳定性（非转录水平）的分子机制。
   • 拓展 lncRNA 功能：MEG3 作为”分子支架”稳定 DLST 蛋白，影响线粒体能量代谢（KGDHC 复合物），连接表观遗传与代谢调控。
2. 应用前景：
   • 畜牧业： 为猪肌肉发育育种提供新靶点（DLST 基因位于猪 7 号染色体，与产肉性状相关）。
   • 医学： 为肌肉损伤修复、肌萎缩疾病治疗提供潜在干预策略（如靶向 MEG3-DLST 轴）。
3. 技术创新：
   • 结合 RNA pull-down/RIP 筛选互作蛋白、CHIP-qPCR/荧光素酶报告 验证转录调控、体内 ASO 敲低 等多维度技术，为 lncRNA 功能研究提供范式。