外泌体介导的NF-κB c-Rel靶向治疗在加速角膜伤口愈合中的作用

文献标题

Accelerating corneal wound healing using exosome-mediated targeting of NF-kB c-Rel

采用英格恩产品的实验部分

文献背景

1. 角膜损伤的临床问题：
   • 角膜上皮完整性对视力至关重要，损伤后易引发炎症、感染甚至失明。
   • 糖尿病患者的挑战：近50%患者角膜愈合延迟，易感染。
2. 现有疗法局限：
   • 人工泪液需频繁使用，抗炎药有副作用，手术存在风险。
3. c-Rel作为靶点的优势：
   • NF-κB c-Rel主要在免疫细胞表达，促进炎症因子产生；
   • c-Rel缺陷小鼠发育正常且抗感染能力不受影响，安全性高。

文献概要

该研究探讨了外泌体介导的NF-κB c-Rel靶向治疗在加速角膜伤口愈合中的作用。研究发现：

1. c-Rel的作用：角膜损伤后c-Rel及其炎症靶点（如TNF-α、IL-1β等）表达显著升高，延缓愈合；c-Rel缺陷小鼠的角膜愈合速度加快且炎症因子减少。
2. 治疗策略：
   • 纳米聚合物载体：负载c-Rel特异性siRNA（siRel）的纳米聚合物局部滴眼，可加速正常和糖尿病小鼠的角膜愈合。
   • 外泌体载体：人源间充质干细胞（hMSC）衍生的外泌体负载siRel后，疗效优于纳米聚合物，尤其在糖尿病模型中效果更显著。
3. 机制：外泌体能高效将siRNA递送至巨噬细胞和树突细胞（>50%递送效率），抑制c-Rel介导的炎症反应。

使用英格恩产品实验部分：

产品名称：    Entranster™-in vivo transfection reagent（英格恩体内转染试剂）

产品编号：#18668-11-1（北京英格恩生物科技有限公司）

实验流程：

siRNA递送系统构建：

将 c-Rel特异性siRNA（siRel） 或阴性对照siRNA（siNC）与 Entranster-in vivo转染试剂 按说明书混合。

治疗方案：

在小鼠角膜上皮刮除后，立即局部滴加 负载siRNA的纳米聚合物（1.25 µg/眼）。

给药时间点：刮除后0 h、12 h、24 h、36 h（策略1）。

实验目的：

评估英格恩试剂介导的 siRel纳米聚合物 对正常小鼠和糖尿病小鼠角膜伤口愈合的治疗效果。

实验结果（关键发现）

正常小鼠模型：

siRel纳米聚合物组（vs. siNC组）：

角膜上皮缺损面积显著减小（24h: 43.8% vs. 65.5%；36h: 10.1% vs. 29.6%）。

炎症因子（IL-1β、TNF-α等）表达显著降低。

糖尿病小鼠模型：

siRel纳米聚合物组（vs. siNC组）：

角膜愈合加速（48h: 22.3% vs. 54.6%）。

炎症因子水平显著下降。

实验意义

技术验证：

英格恩Entranster试剂成功实现 siRNA体内递送，证实其作为纳米载体的有效性。

治疗机制：

靶向抑制 NF-κB c-Rel 可显著减少炎症因子表达，加速角膜上皮再生。

横向对比：

虽纳米聚合物有效，但外泌体递送siRel的疗效更优（尤其在糖尿病模型中），凸显外泌体作为药物载体的临床潜力。

转化价值：

为角膜损伤（尤其糖尿病相关延迟愈合）提供新型靶向治疗策略。