专利：一种卵巢原位注射实现RNA过表达的方法及应用

文章概要

该专利发明了一种卵巢原位注射实现RNA过表达的方法，通过体内转染技术在小鼠卵巢中特异性过表达RNA（如lncRNA），为研究RNA在卵巢中的功能提供了技术支持。该方法避免了尾静脉注射的无靶向性缺陷，显著减少了转染试剂用量，且操作微创，对小鼠生存无影响。

采用英格恩产品的实验部分

1. 转染试剂：
   • 使用北京英格恩生物科技有限公司的Entranster™-in vivo体内转染试剂。
   • 配比：6.25 μL转染试剂 + 6.25 μL 10%葡萄糖溶液，与lncRNA重组载体稀释液（含6.25 μg载体）混合形成转染复合物。
2. 实验步骤：
   • 通过手术暴露小鼠卵巢，用拉制的玻璃毛细管将25 μL转染复合物直接注入卵巢。
   • 术后缝合并检测转染效果，5天后通过qPCR验证RNA表达水平。

实验意义

1. 技术优势：
   • 靶向性：直接作用于卵巢，避免全身性转染的副作用。
   • 低成本：转染试剂用量仅为尾静脉注射的几十分之一。
   • 高效性：RNA过表达效果显著（如lncRNA提升125倍）。
   • 微创性：手术创伤小，不影响小鼠生存。
2. 应用价值：
   • 为卵巢功能研究（如卵泡发育、激素调控）提供精准的基因操作工具。
   • 可推广至其他局部组织或器官的RNA功能研究。

总结：该方法通过英格恩转染试剂实现了卵巢特异性RNA过表达，兼具高效性、经济性和安全性，在生殖生物学领域具有重要应用潜力。