2026年 11 月 13日, 星期五

DNA转染

客户:做293T细胞转染,遇到了单转质粒过表达没有共转质粒过表达高是怎么回事?

回答: 1. 启动子竞争与转录因子的“稀释” 如果你在共转染中加入的是一个非表达质粒(载体骨架)或特定的辅助质粒,目标表达量反而增高,可能是因为单转染时目标质粒浓度过高,导致细胞内的转录因子被“过度征用”或者触发了细胞的应激机制。 适当的质 …

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请问一下,转染带荧光标记的NC,转染后需要拍照看转染效率,在转染后4-6小时换液吗?

一般原则: 1.转染试剂对细胞有毒性。因此通常会建议在 4–6小时后更换新鲜培养基,以减轻毒性,保证细胞状态。 2.换液是否影响转染效率? 针对你要拍荧光观察转染效率的情况: 如果只是想观察转染效率,一般建议 不要太早换液,至少等到荧光信号 …

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进行2个不同基因的siRNA共转染,需要加大核酸或者转染试剂的剂量吗?这个和做2个质粒共转染有什么区别?

进行2个不同基因的siRNA共转染时,确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量,但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量: 当你进行siRNA共转染时,转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说,一般情况下转染试剂的量不需要 …

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在共转染中,怎么看质粒的表达能力?通过什么方式呢?

共转染实验中,判断质粒的表达能力通常有几种常见的方式,具体方法取决于你的实验设计和质粒中所包含的标记。以下是几种常用的检测方式: 1. 荧光标记 如果质粒中包含了荧光标记基因(如GFP、RFP等),通过显微镜直接观察荧光信号是最直观的方式。 …

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荧光表达的细胞在冻存后72小时后再测荧光情况,可以吗?

荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光,但有几点需要注意: 细胞存活率:冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好,具有正常的形态和活力。 荧光稳定性:荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。 …

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