瘤内注射 Entranster 包裹 siRNA 敲低 circCCT2 抑制 HNSCC 移植瘤生长

1. 研究背景与问题

头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）是一种侵袭性强、预后较差的恶性肿瘤。环状 RNA（circRNA）在人类恶性肿瘤中扮演关键调控角色，但其在 HNSCC 中的功能和机制仍需深入研究。本研究聚焦 circCCT2，旨在阐明其在 HNSCC 发生发展中的作用及分子机制。

2. 模型与分组

研究采用 4 周龄雌性 BALB/c 裸鼠，在 SPF 级动物实验室饲养。将 4×10⁶ 个 CAL-27-miRFP709 细胞（稳定转染 miRFP709 近红外蛋白的 CAL-27 细胞系）双侧皮下注射至裸鼠体内。每 2–3 天测量肿瘤长度和宽度，肿瘤体积按（长度×宽度²）/2 计算。当肿瘤大小接近约 60 mm³ 时开始给药，左侧注射阴性对照（NC），右侧注射 si-circCCT2，进行自身对照。

3. 本公司产品在这个实验里具体怎么用的

本实验使用 Entranster（Engreen Biosystem, China）包裹 siRNA 进行瘤内注射。具体操作：将 5 µg siRNA 与 3 µL Entranster 混合，每 3–4 天注射一次。当部分肿瘤长度超过 10 mm 时，裸鼠共接受八次 siRNA 给药，周期约一个月。给药结束后，将小鼠置于小动物麻醉机诱导盒中，用 2% 异氟烷吸入麻醉，待意识丧失后断颈处死，取出移植瘤称重并拍照。

4. 结果要点

研究发现 circCCT2 在 HNSCC 组织和细胞中显著上调，高表达与晚期 T 分期、N 分期、临床分期及不良预后相关。功能上，circCCT2 在体外和体内均促进 HNSCC 发展。机制上，circCCT2 作为竞争性内源 RNA（ceRNA）或 miRNA 海绵，直接结合 miR-146a-5p 并上调白细胞介素-1 受体相关激酶 1（IRAK1）的表达。在体内实验中，瘤内注射 Entranster 包裹的 si-circCCT2 可抑制肿瘤生长，并降低 Ki67、N-cadherin 和 SNAI2 的表达水平。

5. 这个案例对同类课题的参考价值

本案例为研究 circRNA 在实体瘤中的功能提供了一种可行的体内敲低策略：利用 Entranster 包裹 siRNA 进行瘤内注射，可在移植瘤模型中实现目标基因的沉默，并观察对肿瘤生长及蛋白表达的影响。对于从事 HNSCC 或其他实体瘤 circRNA 功能研究的研究生和技术员，该方案在给药剂量、频率和自身对照设计上具有参考意义。若需进行体外细胞转染或病毒包装等实验，可参考本公司转染试剂选型指南选择适合的试剂。

6. 文献出处

论文题目：CircCCT2/miR-146a-5p/IRAK1 axis promotes the development of head and neck squamous cell carcinoma.

DOI: 10.1186/s12885-025-13464-x

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