英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
转染时复合物刚混完就发白、像稀牛奶，多半不是试剂坏了，而是两个参数先跑偏了。
按可能性从高到低排查：先看孵育时长，再看 DNA 浓度，最后核对稀释液和加样手法。
用 Entranster-H 做 HEK293 全系转染时，复合物制备条件可以对照下面几条：
▫️ 试剂稀释液室温静置 5 分钟
▫️ 缓慢加入 DNA 稀释液，吹吸 8-10 次或涡旋 3-5 秒
▫️ 室温静置 15-20 分钟，不超过 25 分钟
▫️ 质粒浓度 >500ng/μl，OD260/280=1.8-2.0，OD260/230>2.0
▫️ 稀释液用 OPTI-MEM 或无血清 DMEM，不能用 PBS 或含血清培养基
▫️ 6 孔板：5μg DNA + 50μl 稀释液，5μl 试剂 + 50μl 稀释液，培养基 2ml
如果复合物已经浑浊，建议弃掉重配，不要直接加进孔里。
适用边界：这套排查针对 HEK293 全系贴壁与悬浮转染；原代细胞、神经元等脆弱细胞不在 Entranster-H 的常规推荐范围内。悬浮转染的孵育时间更紧，室温静置 15 分钟，严禁超过 20 分钟。具体用量参考产品操作手册。
你们遇到浑浊时，是重配还是硬着头皮加进去了？
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