2022年 1月 24日, 星期一
新闻

细胞的支原体检测——扫描电子显微镜法

(一)原理

利用电子显微镜的超级放大功能, 直接观察培养细胞中支原体污染情况。

(二)材料与设备

待检测细胞, 0.05%胰蛋白酶/0.02%EDTA 、2.5%的戊二酸、1%饿酸、0.1mol/L磷酸缓冲溶液( pH7.4 ) ,扫描电镜及相关设备。

( 三)操作步骤

1. 将待检测细胞传代至贴有盖玻片的培养皿中。
2. 37°C , CO2 培养箱中培养24h , 取出盖玻片。
3. 以PBS 洗涤3 次。
4 . 以2 .5%戊二醛/PBS 固定15min , PBS 洗涤。
5 .以1%饿酸固定30min, PBS 洗涤。
6 . 乙酸异戊酯脱水。
7. CO2 冰点干燥。
8. 喷金。
9 . 扫描电镜观察,照相。

(四)结果分析

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