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RNA转染

RNA细胞转染的影响因素

转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA …

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如何优化RNA细胞转染实验条件?

可从以下几方面进行优化: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如 …

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siRNA细胞转染过程常见问题及解答

RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效 …

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RNA细胞转染实验影响因素

转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA …

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RNA转染(Entranster)与睾丸生殖细胞肿瘤研究

睾丸生殖细胞瘤(Testic..cell tumors,TGCTs)是青少年和青年男性最常见的实体瘤之一,约占2012年全世界20~39岁男性肿瘤的8.9%。肿瘤生长受癌细胞与肿瘤微环境的串扰调制。最近的进展表明,肿瘤细胞中的miRNA功能障碍可以调节肿瘤微环境以间接决定其进展。然而,这一过程在睾丸生殖细胞肿瘤(TGCTs)中知之甚少。现分享一篇RNA转染( …

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RNA转染(Entranster)与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究

丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …

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RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染研究

如今,人类胚胎干细胞中小干扰RNA(siRNA)或质粒DNA(pDNA)低转染效率已经成为遗传操作的关键问题。对于高效转染siRNA和质粒进入胚胎干细胞的方法的发展需求变得越来越迫切。现分享一篇RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染的文献,以供参考。

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RNA转染(Entranster)与桥本甲状腺炎患者T辅助细胞1型细胞研究

桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis ,HT),又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎,是一种器官特异性自身免疫性疾病,特点是甲状腺实质淋巴细胞浸润,弥漫性甲状腺肿大和自身抗体升高的升高,主要包括抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)。HT现在被认为是最常见的自身免疫性疾病,常与其他自身免疫性疾病相关,如Graves病 …

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